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在前几期的内容中,EFL向大家分享了水凝胶微球在研究主题和实验操作上的一些科研干货。事实上,在微球制备和研究的过程中值得我们关注的问题还有很多。其中,单分散性(即微球粒径及粒径分布)在不少的SCI论文的插图中我们总能看到它们以各种形式出现,仿佛已经成为在微球应用于各类研究前的一项必备参考指标。

参考资料:
https://doi.org/10.1002/advs.201802342

参考资料:
https://doi.org/10.1016/j.jcis.2010.09.034

参考资料:
https://doi.org/10.1002/smll.201801095
为方便大家在微球有关研究中的数据处理,本期EFL以2021年《Chemical Engineering Journal》上发表的一篇文章《Gas-shearing synthesis of core-shell multicompartmental microparticles as cell-like system for enzymatic cascade reaction》为例,利用imagej,Excel和Orgin这三种在科研中的常见软件带大家了解一下粒径分布图的绘制流程。
B图为微球显微镜下实物图,Scale bar为300μm;C图中,n为参与统计的微球个数,mean为微球直径平均值,SD是微球直径的标准偏差,CV值是变异系数,其计算公式为:标准偏差SD/微球直径平均值mean*100%,根据文中提供的数据,本案例中CV=6.05%,大家可根据图中提供的数据利用上述公式自行验证。

首先我们用imageJ获取微球的直径信息:
(1)利用imageJ打开图片

(2)设置标尺长度
沿图中标尺拉出一条水平直线(可按住Shift键控制水平)

依次点击Analyze-Set Scale,出现弹窗后将Known distance设置为300,单位设置为μm后点击ok


(3)测量微球尺寸
依次点击Analyze-Tools-ROl Manager后出现如下弹出窗口

勾选Show All

用直线工具测量微球直径,依次点击Add

待统计完成后点击Measure得到微球尺寸信息(由于图中微球数量有限,本次仅统计50个微球信息)

点击File保存测量信息

结果被保存为Excel表格,Length为刚刚测量的微球直径信息(在此可根据Excel的内置函数对微球的SD和mean进行计算)

(4)微球粒径分布作图
打开Orgin作图软件(演示软件版本为Origin 2019 b),将Length列的信息粘贴到此处后选中数据

依次点击绘图-统计图-分布图

得到如下结果

右击图片后点击绘图细节即可对绘制结果的表现形式进行各类调整,大家可根据自己的需要自行设置


以上即为评价微球单分散程度数据处理过程的简单分享,在实际统计过程中,大家还可以对每个微球沿着不同方向测量后计算平均值,这样得到的结果会更加准确。如果大家有更好的方法也欢迎在评论区留言讨论分享哈!更多实用干货我们下期再见!