常见问题

/ Common Problem

问:只用EFL的真空除泡装置和模具,用自己的材料可以做微针吗?

答:可以的。EFL给出了两种常用材料的微针制备工艺流程,如只要做一个稳定的微针载体,不想测试各实验条件,则直接采购EFL微针制备全套产品,负载您需要添加的物质即可,轻松免去实验前期探索过程,高效节约时间。如您对微针材料有特殊要求,则参考给出的微针制备工艺流程操作,根据自己材料的性质进行各步骤条件优化,制备出来的微针理化性能可满足您的实验需求即可。

问:水凝胶制备的微针如何进行SEM表征?为什么我做SEM表征的时候针都是歪的,可能是什么原因呢?

答:制备好的微针保持干燥状态,按电镜制样步骤,直接喷金拍摄即可。微针歪的原因可能是因为①未充分干燥,微针针尖强度不够;②脱模不当,可以用附带的胶带粘住微针背面,顺微针方向脱模。

问:我看到固化环(EFL-SCR系列)可以辅助做2D/3D细胞培养,但种类型号好多啊,有什么不同吗?可以重复使用吗?应该如何选择?

答:固化环为无菌包装,可重复使用。去除大块的水凝胶后(注意:如未去除,水凝胶溶涨会破坏固化环的结构,会导致环面不平整),浸泡在自来水中,放2天,水凝胶会自然降解,再用去离子水冲洗干净,晾干,放置于超净台照30min即可重复使用。防粘膜使用后用75%酒精擦一下,晾干就可以重复使用了。

问:那个防粘膜(EFL-GRF-001/002)有什么区别?为什么我用的时候感觉有时候并没有很防粘啊?水凝胶还粘在上面,剥离的效果并不好?

答:两种防粘膜均可用于水凝胶和生物树脂的分离,其中EFL-GRF-001是两面均可以使用防粘,EFL-GFR-002是一面防粘,另一面涂有压敏胶,可以撕开薄膜贴在培养或皿玻璃板等其他物体表面。如使用的是EFL-GRF-002,需注意使用的面是否是可防粘面。如使用防粘膜出现分离效果不理想的情况,需考虑以下因素:①制备的水凝胶是否强度过弱,水凝胶自身成胶强度小于剥离力,导致剥离过程中胶体断裂,该现象有时在防粘膜搭配固化环使用时也会出现。②防粘膜是否被反复使用过久出现毛躁现象或者长期置于超净台照射,导致膜表面理化性质改变。③防粘膜表面是否太脏了,可使用75%擦拭洁净后使用。④制备的水凝胶本身是否是强粘附性能的水凝胶或水凝胶体系中是否添加了增强物理性粘附的材料,分离效果有时会受这些因素影响。

问:EFL在售的光引发剂有三种(EFL-LAP、EFL-I2959、EFL-TPOL),有什么不同吗?为什么材料里赠送的光引发剂选LAP呢?

答:光引发剂EFL-LAP和EFL-I2959均为水溶性,粉末状;光引发剂EFL-TPOL是油溶性,液体。LAP用365nm或405nm光源均可以引发,I2959只能用365nm引发。LAP作用浓度低,常用0.25%(w/v)浓度,微量高效,固化时间短,使用EFL-LS-1600系列手电光源,405nm光源在10s内即可成胶,365nm光源5s内即可成胶。而I2959常用0.5%(w/v)浓度,固化效率低,使用365nm光源固化30s可成胶,且成胶强度较弱。同等条件行细胞活性测试,LAP生物相容性优于I2959,故EFL在售材料中附赠的引发剂为LAP。

问:为什么我用那个GelMA裂解液(EFL-GM-LS-001)裂解15%(w/v)GM90会超过说明书建议的工作时间2h啊?

答:GelMA裂解液主要用于裂解GelMA胶块并释放出胶内细胞,实现二次传代培养或进行基因组学和蛋白组学的检测,可有效的保持细胞的完整性和活性。裂解速度与 GelMA 型号、使用浓度以及胶块大小均有关,通常 0.5~2h 即可充分裂解。您使用15%的高浓度,且取代度为90%的GelMA,相对裂解时间会长很多,如使用的是纯15%EFL-GM-90,按说明书操作可在3-4h内完成整个裂解过程。GelMA分子量越大,取代度越高,浓度越大,胶块越大,其对应的裂解时间越长。如您使用的非EFL产品,会受GelMA分子量和实际取代度以及是否添加其他复合材料等其他因素干扰,实际裂解效果有时会不可控。

问:我看到EFL也有售细胞活死染色试剂盒(EFL-CLD-001)和TRITC-Phalloidin罗丹明标记鬼笔环肽(EFL-FA-001),这个和其他厂家卖的有什么不同吗?还是专门用来染水凝胶培养的细胞呢?

答:EFL在售的这两种染色试剂可满足市售同类产品的所有功能。此外,作用于水凝胶细胞培养的胶块有更好的特异性,可清晰的标记上细胞,同时保证水凝胶无明显的背景着色,提高了拍照所获图片的质量。活死染色试剂盒(EFL-CLD-001)可避免细胞染色出现同一细胞着色又红又绿的异常现象,TRITC-Phalloidin罗丹明标记鬼笔环肽(EFL-FA-001)信噪比高,对细胞骨架着色能力更强

问:烯类偶联水凝胶荧光染料(EFL-DYE-UF-ENE系列)是特异性给含有碳碳双键的水凝胶稳定标记上荧光吗?如果我用它和甲基丙烯酰化的透明质酸(HAMA),还有普通的透明质酸(HA)一起混合光照制备成复合水凝胶,是不是它只和HAMA结合,不和HA结合,这样是不是就可以拍出来HAMA与HA的分布?

答:烯类偶联水凝胶荧光染料可特异性与带有碳碳双键的水凝胶光交联结合在一起,给水凝胶稳定的标记上荧光,目前有红、绿、蓝三种荧光颜色。其可以与HAMA光交联结合,且不与HA结合,但由于HAMA和HA可以在水溶液互溶为一体,仅有荧光标记是无法用显微镜观察到两者的分布差异。

问:微针模具(EFL-MMN系列)为什么只有EFL-MMN-500和EFL-MMN-600两个型号的啊?可以定制其他尺寸的模具吗?

答:EFL-MMN系列微针模具目前只有两种规格,是科研常用的两种尺寸,详细参数信息见表格。目前不接定制化微针模具业务。

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