样本

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  使用指南

  GelMA水凝胶表面细胞培养（2D培养）

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  使用指南

  GelMA水凝胶内部细胞培养（3D培养）
  

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  使用指南

  GelMA水凝胶溶液制备。
  

HAMA水凝胶使用常见问题

甲基丙烯酰化透明质酸（HAMA）具有大量的羧基及羟基，为化学改性提供了丰富化学位点，例如引入粘附基团、药物/活性因子的嫁接等。EFL团队研制的HAMA具有可见光固化和良好的生物兼容性的特点，已被应用于许多生物医药研究领域，包括：软骨细胞培养及软骨再生修复、肿瘤模型构建、高强度及粘附性水凝胶构建、药物控释、微针制备、伤口敷料、生物传感器、术后防粘连等。为了帮助用户更好的使用EFL-HAMA系列水凝胶产品，EFL团队现整理HAMA水凝胶使用相关的高频问题如下，可供参考。

• Q1：EFL-HAMA-150K和EFL-HAMA-400K有什么区别？
  答：①HAMA-150K 分子量是150KDa，HAMA-400K的分子量是400KDa。②同等条件下，400K的溶液要比150K黏稠很多，150K固化后的水凝胶强度比400K大，但水凝胶质地要比400K脆，400K更韧一些。
• Q2：HAMA怎么保存
  答：干态套装：室温，3个月；4℃，12个月；-20℃，18个月。无菌溶液：4°C避光，7天；-20℃避光，6个月。
• Q3：为什么5%（w/v）HAMA-150K不到1h就溶解好了，但2%（w/v）HAMA-400K半天都溶解不了呢？
  答：HAMA-400K的分子量相对较大，溶解速度回相对慢很多，溶解过程中需要磁力搅拌促溶。2%（w/v）HAMA-400K溶液的会很粘稠，完全溶解后的液体黏稠度也要比5%（w/v）HAMA-150K高很多，正常磁力搅拌溶解，可以在1-2h完全溶解。您如果2%（w/v）HAMA-400K半天都溶解不了，可能有以下原因：①很是没有正确使用磁力搅拌器溶解，配制液体过少，未能沒过转子；单次整块材料溶解，未将材料分解成小块分批投放溶解，材料体积过大，导致材料表面溶解形成一层粘稠胶层，液体不易浸入，从而使材料糖心化，导致溶解速度减缓。②溶解过程中未在容器外包裹铝箔纸避光，HAMA的凝胶点很短，微弱365-405nm波段的光即可使其发生部分交联，溶解过程中应避免阳光照射或长时间暴露在灯光下，避免溶解过程中表层已溶解的材料凝胶化从而影响材料的进一步溶解。
• Q4：HAMA水凝胶溶液有哪些灭菌方式？
  答：①HAMA属于多糖类，性能比较稳定。常用使用0.22um滤膜过滤除菌即可。②如果使用的浓度较高，或者不想过滤除菌，可以使用巴氏除菌法，也可配制成需要的溶液浓度后使用121度高温高压20min除菌，但从放入灭菌锅到灭菌结束全程最好不要超过3h，避免持续性高温使分子链明显发生断裂，从而影响固化效果。③不可直接将材料置于紫外下照射灭菌，亦引发材料交联，导致材料溶解性能不佳。PS:固化后的水凝胶支架可以辐照灭菌，性能不受明显影响。
• Q5：HAMA分子上有哪些功能基团？我想做进一步改性，如接枝药物等。
  答：HAMA分子上含有大量羧基和羟基官能团，其中羧基最常用于功能化修饰，可通过酯化或酰胺化反应偶联特定分子。
• Q6：您好，我用HAMA制备微针，想把针尖和衬底区分开，应该怎么拍照呢？
  答：如果是用相机或显微镜明场拍实物图，可以使用不同颜色的染料对水凝胶进行染色,使水凝胶结构更具辨识度。EFL已推出防扩散水凝胶染料（货号：EFL-DYE-ND），有红、绿、蓝、黄、紫五种颜色可供选择，有良好的防扩散能力，可视化呈现不同的水凝胶形态，分别对制备针尖和衬底的材料进行染色即可。如果是想拍荧光图，可以使用烯类偶联荧光染料（货号：EFL-DYE-UF-ENE系列）给HAMA稳定标记上不同颜色的荧光，分别制备针尖衬底即可。
• Q7：做不同方向的应用，应该怎么选择用哪种型号的HAMA呢？
  答：一般做投影式光固打印或双光子精加工成形用EFL-HAMA-150K较好，使用浓度在5%-10%（w/v）。挤出打印两个型号的HAMA均可以，但需复合其他材料一起打印，具体选择按需求测试。单纯做3D细胞培养用EFL-HAMA-400K会比较好，使用浓度在0.5~2%（w/v），其中用0.5%-1%（w/v）居多。制作喷雾薄层可选EFL-HAMA-150K。制作创口敷料、预交联可注射水凝胶、涂层等优选EFL-HAMA-400K。制备水凝胶微针优选EFL-HAMA-150K，操作更简单，常用5%（w/v）的浓度（微针制备教程）。其他应用需求可参考产品理化性能介绍，按需选择合适的型号和使用浓度进行测试。
• Q8：细胞是不是没法在光固化后的HAMA上贴壁生长？有解决办法吗？
  答：HAMA表面没有细胞粘附位点，所以细胞没办法在HAMA水凝胶表面粘附贴壁。您可以按需进一步进行改性，在HAMA上接RGD肽，也可以选择直接采购EFL在售产品丙烯酰化RGD肽（货号：EFL-Pep-RGDfKAC），可直接将RGD肽以光交联的形式稳定接到HAMA上，可直接提升材料的细胞粘附性能，免去您合成改性的时间。
• Q9：HAMA在组织表面的粘附性能怎么样？我想用HAMA当做胶水替代手术缝合可以吗？
  答：高分子量的HAMA溶液很黏稠，涂布在损伤的组织表面有较好的附着性能，适合作为创口敷料。单纯HAMA水凝胶，其固化后的水凝胶粘附性能和强度目前均达不到直接替代手术缝合线的要求。HAMA上有丰富的可改性基团，可以进一步改性做化学修饰，或结合其他材料一起构建复合水凝胶，从而进一步提高其作为粘合剂使用的粘附性能。
• Q10：HAMA表面没有细胞粘附位点，那我可以用HAMA培养细胞微团吗？
  答：可以。可选择利用投影式光固化打印机（货号：EFL-BP-86系列）直接打印出HAMA基带有固定尺寸的球形凹槽结构模版，在模版上接种目的细胞，细胞可自发落入球形凹槽中汇聚成团生长，即可培养出尺寸规整的细胞微团。